贵阳HE染色效果

时间:2021年03月16日 来源:

天狼星红的染色法原理是什么?

原理利用胶原分子与强酸性染料天狼星红结合一起后加强双折光现象,使不同颜色和形态的胶原纤维得以区分。

胶原纤维(collagenousfiber)在三种纤维中数量**多,新鲜时呈白色,有光泽,故又名白纤维。在HE染色切片中呈嗜酸性,粗细不等,直径0.5~10um,呈波浪形,有分支并交织呈网,胶原纤维的生化成分为I型胶原蛋白。

胶原蛋白(collagen)由纤维细胞分泌,于细胞外聚合成胶原原纤维,经少量黏合成胶原纤维。胶原纤维是三种纤维中分布*****的一种纤维,***分布于各脏器内,它在皮肤、巩膜和肌腱**为丰富。

胶原纤维在上述的两种方法中着染不同的颜色,如V.G着染红色,Masson氏着染蓝色或绿色。

这主要取决于染料对组织的渗透、吸附、沉淀和反应,而染料分子量的大小是关键,分子量小的分子移动迅速,行动快,对组织的渗透性较强,能穿透较为致密的组织。 苏木素VG法:细胞灰黑色,髓鞘灰白色,胶原红色,肌纤维黄色,***细胞浆琥珀黄色,胶质纤维琥珀色。贵阳HE染色效果

HE染色的试剂与仪器A:0.5~1%的伊红酒精溶液:

称取伊红Y0.5~1g,加少量蒸馏水溶解后,再滴加冰醋酸直至浆糊状。以滤纸过滤,将滤渣在烘箱中烤干后,以95%酒精(即工业酒精,如果不怕浪费,用无水乙醇配制也可)100毫升溶解。

B:苏木素染液配方:(配制3000ml,可按比列减少)

苏木精6g

无水乙醇100ml

硫酸铝钾150g

蒸馏水2000ml

碘酸钠1.2g

冰醋酸120ml

甘油900ml

配制方法:将苏木素溶于无水乙醇,再将硫酸铝钾溶于蒸馏水,溶解后将甘油倾入一起混合,***加入冰醋酸和碘酸钠。

C:1%盐酸酒精分化液:将1毫升浓盐酸加入99毫升70%酒精中即可。 上海天狼星红染色试剂罗丹明染色法:铜沉积物-砖红色,核-蓝色,胆汁-绿色。

实验室常用人工染料(3)苏丹II:

苏丹II是弱酸性染料,呈红色粉末状,易溶于脂肪和酒精(溶解度为0.15%)。 苏丹I是脂肪染色剂。

伊红:

这类染料种类很多。常用的伊红Y,是酸性染料,呈红色带蓝的小结晶或棕色粉末状,溶于水(15摄氏度是溶解度达44%)和酒精(溶于无水酒精的溶解度为2%)。伊红在动物制片中广泛应用,是很好的细胞质染料,常用作苏木精的衬染剂。

碱性品(复)红:

碱性品红是碱性染料,呈暗红色粉末或结晶状,能溶于水(溶解度1%)和酒精(溶解度8%)。碱性品红在生物学制片中用途很广,可用来染色胶原纤维、弹性纤维、嗜复红性颗粒和***组织的核质。在生物学制片中用来染维管束植物的木质化壁,又作为原球藻、轮藻的整体染色。在细菌学制片中,长用来鉴别结核杆菌。在尔根氏反应中用作组织化学试剂,已核查脱氧核糖核酸。

冷冻切片HE染色步骤:(1)冰冻切片固定10~30s

(2)稍水洗1~2s

(3)苏木**染色(60℃)30~60s

(4)流水洗去苏木**5~10s

(5)1%盐酸乙醇1~3s

(6)稍水洗1~2s

(7)促蓝液返蓝5~10s

(8)流水冲洗15~30s

(9)0.5%曙红液染色30~60s

(10)蒸馏水稍洗1~2s

(11)80%乙醇1~2s

(12)95%乙醇1~2s

(13)无水乙醇1~2s

(14)石炭酸二甲苯2~3s

(15)二甲苯(Ⅰ)2~3s

(16)二甲苯(Ⅱ)2~3s

(17)中性树胶封固

注:第(14)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇。

染色结果:细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。

注意事项:

切片脱水透明,切片经HE染色后,要彻底脱水透明,才能用中性树胶封盖。如果脱水不彻底,封片后呈白色雾状,镜下观察模糊不清,且容易褪色。切片1-2级无水乙醇脱水,也可使用石炭酸二甲苯进行脱水。石炭酸有较强脱水能力,但长时间可使切片脱色,因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去。 高碘酸无色品红法:将脂褐素染色;脂褐素呈深紫色颗粒,粘液也呈深紫色。

细菌染色剂配方一、齐氏(Zieh1)石炭酸品红染液

甲液:取石炭酸5克,溶解在95毫升蒸馏水中。

乙液:取03克碱性品红,放入研钵中研磨,逐渐加入10毫升95%酒精,继续淹役,使它溶解。

将甲液和乙液混合后,摇匀,过滤,装瓶,备用。

配方二、罗氏(loffler's)美蓝染液

甲液:取S克美蓝,溶于100毫升95%6酒精中,制成美蓝一酒精饱和液。

乙液:取氢氧化钾0.01克(或1%氢氧化钾溶液1毫升),溶液也可用于放线菌染色,0.1%浓度可用于酵母菌染色。

配方三、革兰氏(Gram's)染液

用此液染色因先用甲液染色,再加乙液固定,丙液处理,***用丁液复染。四种液体的配方如下:

甲液:结晶紫液

(1)结晶紫2克95%酒精20升

(2)草酸铵0.8克蒸馏水80毫升

使用前将(1)、(2)液轻摇混匀,静置48小时后使用。

乙液:碘液

碘1克碘化钾2克蒸馏水300毫升

将碘化钾溶于少量蒸馏水中,然后加入碘,待碘全部溶解后,加水稀释至300毫升。

丙液:95%酒精溶液

丁液:番红花红液

2.5%番红花红酒精溶液10毫升蒸馏水100毫升。 中文名:masson染色,释义:用两种或三种阴离子染料混合,作用:显示组织中纤维的染色方法。安徽天狼星红染色效果

砂罗铬花青法:髓鞘呈鲜蓝色,细胞核呈深蓝色,胶原纤维呈粉红色。贵阳HE染色效果

切片的载玻片和盖玻片有什么区别?

载玻片是用来放被测标本的,而盖玻片是盖在被测标本之上的。

1.载玻片在下边,是你要观察版的物质的盛放载体权,就是你要把东西放你它上面。

2.盖玻片比载玻片要小,载玻片主要用来盛放观察物,盖玻片是盖在载玻片上的,用做固定用的。

3.载玻片是转片中的比较厚的一块玻璃片,是用来承载实物的;盖玻片是那个小的圆的或者方/薄 的。

4.装片是一套东西的总称,包括载玻片、盖玻片和装载的实物。

5.盖玻片正方形,载玻片长方形,且宽度都较盖玻片的边长大。

载玻片和盖玻片如何清洗?

载玻片是一直泡75%酒精,用的时候才拿出来晾干或者烧干酒精就用,不会有什么灰尘;盖玻片是一次性的,用完就扔了。


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